糖化血紅蛋白的測定

1、糖化血紅蛋白的生化特性

正常人有三種血紅蛋白：HbA、HbF、HbA2， 而成人紅細胞中主要含有HbA。 在用層析法分離血紅蛋白時， 可洗脫出3種含糖成分即：HbA1a、HbA1b、HbA1c， 合稱為糖化血紅蛋白。 HbA1c是葡萄糖化血紅蛋白， 另兩種是其他糖形成的糖化紅蛋白。 糖化血紅蛋白由HbA在代謝過程中與葡萄糖結合形成， 因而它可準確地反映血中葡萄糖水平。 我人測定的系指HbA1c。

2、糖化血紅蛋白的測定方法

（1）高壓液相法較為準確， 除對糖化血紅蛋白測定外還對血紅蛋白各組分進行分析。 但儀器昂貴難普及。
（2）目前多採用比色法， 其原理是， 具有酮胺鍵的GHb在酸性環境中加熱，

其已糖化部分脫水生成5－羥甲糖醛（5－HMF）， 後者可與a－硫代巴比妥酸（TBA）起顯色反應。 此有色物質在443mm處有吸收峰， 可用於GHb定量。 操作步驟為：加冷蒸餾水於壓積的紅細胞中製備溶血液並由甲苯他離紅細胞膜碎片；取該溶血液加入草酸混合後置100℃水浴水解；水解液中加入三氯醋酸混和、離心；吸出上清液加入TBA混和保溫， 用分光光度計在443mm處比色。 此法不受其他血紅蛋白干擾， 無需特殊設備， 操作方便， 成本低廉。
（3）層析法是採用陽離子交換樹脂裝柱， 用兩種不同緩衝液洗脫HbA和HbA1分光光度計比色後計算HbA1百分比。 由於國內分離效果不理想， 因而沒有比色法普遍。

（4）普通電泳法對HbA和HbA1分離效果不理想， 而等電聚焦電泳因設備昂貴難以推廣。

3、臨床意義

GHb的形成是一種無需酶催化、緩慢、連續、不可逆的化學反應；在紅細胞生存的120天內， 此反應自始至終進行著， 其生成速度與血糖濃度成正比。 因此GHb含量反映了測定前1～2個月中血糖的總水準， 不受血糖暫時波動的影響。 空腹血糖或餐後血糖反映的是抽血暫態的血糖濃度。 尿糖定量則反映24小時血糖總水準。 因此這三個指標從不同時間反映糖尿病的控制情況和糖尿病本身的嚴重程度。

糖尿病人GHb水準顯著高於正常人， 隨病情嚴重程度而升高。 Ⅰ型糖尿病較Ⅱ型糖尿病水準偏高。

血紅蛋白的糖化可導致組織缺氧。 由於蛋白質結構、功能、代謝和半衰期的改變， 與糖尿病的慢性併發症， 諸如：糖尿病性腎病、白內障、動脈樣硬化等發病機理有關。