(一) 產前診斷
1．血型抗體測定
產婦血型抗體測定， 第一次可在妊娠4個月時進行， 以瞭解抗體的基礎水準。 然後於7～8個月再測定， 以後每隔2～4周重複一次。 若抗體效價上升， 提示胎兒可能受累。 當抗體效價達1， 32時， 宜作羊水檢查。
2．羊水檢查
正常羊水無色透明， 重症溶血病羊水呈黃色。 胎兒溶血程度愈重， 羊水中的膽紅素含量越高。 故利用分光光度計測定羊水的光密度， 可瞭解羊水中的膽紅素含量， 對判斷胎兒疾病的嚴重程度有助。
3．B 超檢查 對診斷胎兒重度水腫併發腹水有幫助。
(二) 產後診斷
1．異常分娩史 曾有過死胎或分娩過原因不明的黃疸、貧血、水腫的胎兒。
2．臨床表現 主要有不同程度的黃疸、貧血、肝脾腫大。
3．實驗室檢查
(1) 紅細胞及血紅蛋白下降， 網織紅細胞增高(iE常新生兒生後第一天網織紅細胞可達6％)， 有核紅細胞增高(正常新生兒生後1～2天周圍血有核紅細胞占2％～10％)， 均提示患兒可能存在溶血。
(2) 檢查母嬰血型(ABO或Rh血型)， 以瞭解母嬰之間是否血型不合。
(3) 新生兒血型特異性抗體測定
1) 抗人球蛋白
陽性結果表示患兒紅細胞已被血型抗體致敏。 Rh溶血症直接法常為陽性。 ABO溶血症由於患兒紅細胞上的抗體(1gG)結合較少， 常為陰性。 因此必須採用改良法直接抗人球蛋白試驗以提高陽性率。
2) 抗體釋放試驗
致敏的紅細胞所結合的抗體， 可通過加熱釋放於釋放液中。
3) 檢查嬰兒血清中的血型抗體
將嬰兒血清與各標準細胞( CCDee， ccDEE， Ccdee， ccdEe， ccdee )作間接抗人球蛋白試驗， 陽性結果， 則表示有血型抗體存在。 然後根據凝集的標準紅細胞的抗原性質， 可推論相應的抗體。
(4) 母親血清中的血型抗體測定
由於Rh血型抗體只能由人類紅細胞引起， 故母體記憶體在Rh血型抗體， 對新生兒Rh溶血症的診斷， 有相當重要的意義。 但必須具備新生兒紅細胞的直接法抗人球蛋白試驗陽性結果， 才能確診。
