1.病史 凡有以下危險因素均要考慮細菌感染的可能：①羊膜早破大於12～24h；②母孕後期有發熱和絨毛膜炎病史；③出生時Apgar評分低並有搶救史；④早產、雙胎。
院內感染易發生於下列情況：①新生兒監護病區（NICU）治療的患兒；②有入侵式治療的患兒如氣管插管、臍靜脈插管等；③住院天數長；④接受手術治療的患兒；⑤病房擁擠；⑥長期應用廣譜抗生素治療等。
2.臨床表現 新生兒常表現為非特異性的症狀。
（1）呼吸窘迫 為最常見， 在敗血症嬰兒中占90%， 嚴重程度可有不同：如輕微的呼吸急促， 鼻掮呼吸三凹征、對氧的需要增加， 呼吸暫停、呼吸困難、甚至出現呼吸衰竭需要人工通氣。
（2）心率增快和周圍迴圈灌注差， 青紫。
（3）低血壓。
（4）酸中毒（代謝性）， 低血糖或高血糖。
（5）體溫不穩定：10%～30%的新生兒可有發熱和體溫不升。
（6）胃腸道症狀：包括嘔吐、腹瀉、腹脹、納差。
（7）活動減弱或嗜睡、煩躁不安、呻吟。
（8）抽痙。
（9）瘀斑或瘀點。
（10）其他如黃疸、肝脾腫大等。
3.實驗室檢查
（1）外周血白細胞計數和分類 血白細胞計數＜5×109/L， 未成熟白細胞和中性粒細胞比例＞0.2提示有細菌感染。
（2）血小板計數 血小板計數＜100×109/L提示新生兒敗血症的可能。
（3）急相蛋白 ①C-反應蛋白＞15μg/ml提示有細菌感染， ②ESR＞15mm/h。
（4）血培養檢查 血培養陽性可確立病因診斷， 疑有感染的患兒均需在入院後用抗菌素前取周圍血做培養， 並應嚴格遵守無菌操作， 防止污染。 如患兒用過作用於細胞壁的抗生素，
（5）其他部位培養 臍部、尿液、大便或其他局部感染灶的培養。
（6）放射學的檢查 胸部X線檢查在有呼吸系統症狀的患兒均應進行。
（7）病原菌抗原檢測 如對流免疫電泳、乳膠凝集試驗， 血凝抑制試驗等方法。
