（一）腦積液 大多於癱瘓前出現異常。 外觀微濁， 壓力稍增， 細胞數稍增（25～500/mm3）， 早期以中性粒細胞為多， 後則以單核為主， 熱退後迅速降至正常。 糖可略增， 氯化物大多正常， 蛋白質稍增加， 且持續較久。 少數患者脊髓液可始終正常。
（二）周圍血象 白細胞多數正常， 在早期及繼發感染時可增高， 以中性粒細胞為主。 急性期血沉增快。
（三）病毒分離或抗原檢測 起病1周內， 可從鼻咽部及糞便中分離出病毒， 糞便可持繼陽性2～3周。 早期從血液或腦脊液中分離出病毒的意義更大。 一般用組織培養分離方法。 近年採用PCR法， 檢測腸道病毒RNA，
（四）血清學檢查 型特異性免疫抗體效價在第一週末即可達高峰， 尤以特異性IgM上升較IgG為快。 可用中和試驗、補體結合試驗及酶標等方法進行檢測特異抗體， 其中以中和試驗較常用， 因其持續陽性時間較長。 雙份血清效價有4倍及4倍以上增長者可確診。 補體結合試驗轉陰較快， 如期陰性而中和試驗陽性， 常提示既往感染；兩者均為陽性， 則提示近期感染。 近來採用免疫螢光技術檢測抗原及特異性IgM單克隆抗體酶標法檢查有助於早期診斷。
