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流行性出血熱的檢查方法

實驗室檢查

(一)常規檢查

1.血象 不同病期中變化不同, 對診斷、預後判定均重要。

(1)白細胞 早期白細胞總數正常或偏低, 3~4日後即明顯增高, 多在(15~30)×109/L, 中性粒細胞明顯左移, 並可出現幼稚細胞, 重型、危重型可出現晚幼粒, 中幼粒, 甚至早幼粒細胞, 呈現類白血病反應。 異型淋巴細胞在1~2病日即可出現, 且逐日增多, 一般為10~20%, 部分達30%以上, 對診斷有參考價值。

(2)紅細胞和血紅蛋白 發熱期開始上升, 低血壓期逐漸增高, 休克期患者明顯上升, 至少尿期下降, 其動態變化可作為判斷血液濃縮與血液稀釋的重要指標。

(3)血小板 全病程均有不同程度降低,

2病日即降低, 低血壓及少尿期最低, 並有異型、巨核血小板出現, 多尿後期始恢復。 血小板顯著減少是本病一項特徵性表現。 下降迅速原因, 除病毒直接損害外, 提示有DIC存在。

2.尿常規 顯著的尿蛋白是本病的重要特點, 也是腎損害的最早表現。 其主要特徵為:出現早、進展快、時間長。 多在2--3病日尿中即開始出現蛋白, 並發展迅速, 可在1天內由“+”突然增至“+++”或“++++”。 少尿期達高峰, 以後逐漸下降, 尿中還可有紅細胞、管型或膜狀物(是凝血塊、蛋白質與壞死脫落上皮細胞的混合凝聚物), 故必須強調多次查尿、有助於診斷。

(二)血液生化檢查

1.尿素氮及肌酐 低血壓休克期輕、中度增高。 少尿期至多尿期達高峰, 以後逐漸下降,

升高程度及幅度與病情成正比。

2.二氧化碳結合力 發熱後期即下降, 低血壓休克期明顯, 少尿期亦有下降, 多尿期逐漸恢復至正常。

3.電解質 血鉀在發熱期可有降低, 休克期仍低, 少尿期上升為高血鉀, 多尿期又降低。 但少尿期亦有呈低血鉀者。 血鈉及氯在全病程均降低, 以休克及少尿期最顯著。 血鈣在全病程中亦多降低。

(三)凝血功能檢查 一般血小板均減少, 有DIC者, 開始為高凝階段, 凝血時間縮短, 但為時較短, 不易觀察。 其後轉為低凝血階段和繼發性纖溶亢進。 低凝階段, 表現為凝血因數大量消耗, 血小板下降, 凝血酶原和部分凝血活酶時間延長, 纖維蛋白原降低。 繼發性纖溶亢進表現為凝血酶凝固時間延長, 纖維蛋白降解物增加及優球蛋白溶解時間縮短。

血漿魚精蛋白副凝試驗(3P試驗)陽性說明有纖維蛋白單體存在, 證明有較多凝血酶及纖溶存在。

(四)免疫功能檢查 普遍有免疫功能異常。

在急性期細胞免疫功能普遍低下, 尤以休克期為甚, 其下降幅度與病情嚴重程度相平行, 至多尿期漸回升。 在EHF患者病程中存在著調節性T細胞數量和功能失常, 表現為病初自發性抑制性T細胞(STs)活性即明顯低下, CD8細胞百分數增加, CD4/CD8比值倒置, 增加的CD8細胞屬於細胞毒性T細胞。

血清免疫球蛋白測定可見IgM和IgA增高, 早期尤其以IgM增高為著。 急性期補體水準下降, 血清總補體及補體C3、C4含量, 在發熱期即開始下降, 低血壓及少尿期尤著, 病情危重者明顯降低。 免疫複合物檢出率增高,

早期即出現迴圈免疫複合物, 腎組織作電鏡或免疫螢光檢查, 在腎小球基底膜見有免疫複合物沉積。

(五)特異性血清學檢查

自病毒分離成功以來, 對本病的特異性診斷技術迅速建立, 檢測物件已由血清抗體發展到尿液抗體, 由檢測抗體發展到細胞內抗原和尿中可溶性抗原, 檢測方法也日新月異。 近來用分子生物學技術如斑點雜交、原位雜交及聚合酶鏈反應(PCR)已試用於EHF的診斷及發病機理研究。

1.免疫螢光技術(IFAT)為常規方法之一。 用間接免疫螢光法檢測患者血清特異性IgM和IgG抗體, 前者在第1病日即可檢出, 第2病日陽性率88.2%, 第3病日達100%;IgG在2病日即可檢出, 4~5病日陽性率達75%。 直接免疫螢光法, 可檢出白細胞及尿沉渣細胞內病毒抗原,
用於早期診斷。

2.酶聯免疫吸附試驗(ELISA) 用雙抗體夾心法檢測可溶性抗原, 用竟爭法檢測阻斷抗體, 特異、敏感, 又可避免需庀暈⒕怠HF-IgM捕獲法ELISA(Mac-ELISA)以不同病日血清IgM檢出率為97.7%, 而IFAT法檢出率為88.7%, 是一敏感、特異的診斷方法。

3.免疫粘附血凝法(IAHA)用於檢測抗體, 其抗體滴度與免疫螢光抗體滴度相仿, 又可區別不同類型病毒抗體。

4.反向被動血凝法(RPHA)用於檢測體液病毒抗原, 與ELISA法滴度基本一致。

5.放射免疫法(RIA)國外用固相放射免疫法與ELISA進行診斷及血清流行病學調查, 其敏感性較免疫螢光法高10倍以上。

6.空斑減少中和試驗(PRNT)中和抗體是EHFV感染後產生的一種重要抗體, 是目前用於病毒血清學分型的主要依據。 本法要求嚴格, 操作複雜費時, 難以在一般試驗室開展。中和效價的高低與病型輕重有關,即重症患者低,中型患者較高。

7.放射免疫沉澱試驗(RIP)有報告用RIP對83份不同病日患者血清測定,抗EHFV-NP(核蛋白)抗體最早出現,大多在4病日便可測出,其後為抗G2(糖蛋白),抗G1僅在少數標本中方能測出。三種病毒結構蛋白抗體滴度也是抗NP最高,抗G1最低。

8.應用cDNA探針檢測EHFV-RNA的研究,最近國內外先後獲得了病毒的M、S片段的多個cDNA克隆,可用於製備檢測EHFV核酸的探針。檢測EHF患者血液、尿液和外周血淋巴細胞中的EHFV核酸,具有較好的特異性和較高的敏感性,為發病機理和診斷研究提供了先進手段。

難以在一般試驗室開展。中和效價的高低與病型輕重有關,即重症患者低,中型患者較高。

7.放射免疫沉澱試驗(RIP)有報告用RIP對83份不同病日患者血清測定,抗EHFV-NP(核蛋白)抗體最早出現,大多在4病日便可測出,其後為抗G2(糖蛋白),抗G1僅在少數標本中方能測出。三種病毒結構蛋白抗體滴度也是抗NP最高,抗G1最低。

8.應用cDNA探針檢測EHFV-RNA的研究,最近國內外先後獲得了病毒的M、S片段的多個cDNA克隆,可用於製備檢測EHFV核酸的探針。檢測EHF患者血液、尿液和外周血淋巴細胞中的EHFV核酸,具有較好的特異性和較高的敏感性,為發病機理和診斷研究提供了先進手段。

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