1、病灶刮片檢查
可對本病進行快速診斷。 用消毒棉簽採取瞼緣和結膜囊標本或用Kimura或Lindner小鏟從潰瘍底部和邊緣取材（分泌物或壞死組織）做塗片， 可迅速確定是細菌感染源。
2、細菌培養
該病的最終診斷必須通過細菌培養才能確定。
（1）血瓊脂培養基：是最常用的固體培養基， 適合於大多數常見的眼部細菌生長。
（2）增菌培養基：所採用的液體培養基有肉浸湯， 肉膏湯， 腦心浸湯等。
（3）培養厭氧菌用硫羥乙醇酸肉湯， 血瓊脂培養基等， 在厭氧袋或厭氧箱中培養， 培養箱溫度為36～37℃。
（4）為提高細菌培養陽性率必須做到：
①在開始應用抗菌藥物治療之前進行培養。
②治療中作培養時， 患者應停用抗菌藥12～24h後再作培養。
③必要時應多次重複取材培養， 特別是在非致病菌機會感染時， 在同部位多次分離得同一細菌時， 就可確定分離菌為致病菌。
3、鱟溶解物試驗（Limulus test）
基於革蘭陰性桿菌細胞壁有可溶性脂多糖內毒素， 細菌死亡時內毒素釋放到感染組織中， 用鱟阿米巴樣細胞溶解物可在1h內快速檢測銅綠假單胞菌， 莫拉菌， 黏質沙雷菌和變形桿菌等革蘭陰性桿菌感染。
