藥材及成方製劑顯微鑒別法"藥材及成方製劑顯微鑒別法
顯微鑒別系指用顯微鏡對藥材的切片、粉末、解離組織或表面製片及成方製劑中藥味的組織、細胞或內含物等特徵進行鑒別的一種方法。 鑒別時選擇有代表性的樣品， 根據各該藥材鑒別項的規定製片。 成方製劑根據不同劑型適當處理後製片。
一、橫切片或縱切片：選取藥材適當部位， 軟化後用徒手或滑走切片法， 切成10～20μm的薄片,選用甘油醋酸試液、水合氯醛試液或其它試液處理後觀察。 必要時可包埋後切片。
二、粉末製片：取粉末少量， 置載玻片上，
三、表面製片：將樣品濕潤軟化後,切取一部分或撕取其表皮,加適宜的試液觀察。
四、解離組織片：如樣品中薄壁組織占大部分， 木化組織少或分散存在， 可用氫氧化鉀法；如果品堅硬， 木化組織較多或集成較大群束， 可用硝鉻酸法或氯酸鉀法。 在解離前， 應先將樣品切成寬或厚約2mm的小條或片。
1．氫氧化鉀法
置樣品於試管中， 加5％氫氧化鉀溶液適量， 加熱至用玻璃棒擠壓能離散為止， 傾去堿液， 加水洗滌後， 取出少量置載玻片上， 用解剖針撕開， 以稀甘油裝置觀察。
2．硝鉻酸法
置樣品於試管中,加硝鉻酸試液適量， 放置， 至用玻璃棒擠壓能離散為止， 傾去酸液，
3．氯酸鉀法
置樣品於試管中， 加硝酸溶液(1→2)及氯酸鉀少量,緩緩加熱， 待產生的氣泡漸少時， 再及時加入氯酸鉀少量， 以維持氣泡穩定地發生， 至用玻璃棒擠壓能離散為止， 傾去酸液， 加水洗滌後， 照1．法操作裝置。
五、花粉粒與孢子製片：取花粉、花藥（或小的花朵）或孢子囊群（乾燥樣品浸於冰醋酸中軟化）， 用玻璃棒搗碎， 過濾于離心管中， 離心， 取沉澱加新鮮配製的醋酐與硫酸(9∶1)的混合液1～3ml， 置水浴上加熱2～3分鐘， 離心， 取沉澱， 用水洗滌2次,加50％甘油與1％苯酚3～4滴,用品紅甘油膠封藏觀察。 也可用水合氯醛試液裝置觀察。
六、細胞及細胞內含物等的測量：在顯微鏡下測量細胞及細胞內含物等的大小， 可用目鏡測微尺測量。
七、細胞壁性質的檢定：
1．木質化細胞壁
加間苯三酚試液1～2滴， 稍放置， 加鹽酸1滴,因木化程度不同,顯紅色或紫紅色。
2．木栓化或角質化細胞壁
加蘇丹Ⅲ試液， 稍放置或微熱， 顯橘紅色至紅色。
3．纖維素細胞壁
加氯化鋅碘試液；或先加碘試液濕潤後， 稍放置,再加硫酸溶液(33→50)；顯藍色或紫色。
4．矽質化細胞壁
加硫酸無變化。
八、細胞內含物性質的檢定：
1．澱粉粒
（1）加碘試液， 顯藍色或紫色。
（2）用甘油醋酸試液裝置， 置偏光顯微鏡下觀察,未糊化的澱粉粒顯偏光現象；已糊化的無偏光現象。
2．糊粉粒
（1）加碘試液， 顯棕色或黃棕色。
（2）加硝酸汞試液,顯磚紅色。 材料中如含有多量脂肪油， 宜先用乙醚或石油醚脫脂後進行試驗。
3．脂肪油、揮發油或樹脂（1）加蘇丹Ⅲ試液， 顯橘紅色、紅色或紫紅色。
（2）加90％乙醇， 脂肪油不溶解（篦麻油及巴豆油例外）， 揮發油則溶解。
4．菊糖
加10％α－萘酚乙醇溶液， 再加硫酸， 顯紫紅色並很快溶解。
5．粘液
加釕紅試液， 顯紅色。
6．草酸鈣結晶（1）加稀醋酸不溶解， 加稀鹽酸溶解而無氣泡發生。
（2）加硫酸溶液（1→2）， 逐漸溶解， 片刻後析出針狀硫酸鈣結晶。
7．碳酸鈣（鐘乳體）
加稀鹽酸溶解， 同時有氣泡發生。
8．矽質
加硫酸不溶解。
九、鑒別由粉末藥材製成的成方製劑時， 散劑照上述粉末製片法製片；丸劑、片劑等， 可取2～3丸（片）研細後， 取少量樣品， 滴加規定的試液， 攪拌均勻， 使粘結的細胞、組織散離， 再按粉末特徵進行鑒別；蜜丸可直接挑取少量樣品製片， 或酌用熱水脫蜜後製片觀察。
附：顯微試液配製法
三氯化鐵試液
取三氯化鐵1g， 加水使溶解成100ml， 即得。
水合氯醛試液
（見附錄ⅩⅤ Ｂ）。
甘油醋酸試液
取甘油、醋酸及水各等份， 混勻， 即得。
蘇丹Ⅲ試液
（見附錄ⅩⅤ Ｂ）。
釕紅試液
取10％醋酸鈉溶液1～2ml，加釕紅適量使呈酒紅色，即得。
本液應臨用新制。
間苯三酚試液
取間苯三酚1g，加90％乙醇100ml使溶解，濾過，即得。
本液應置棕色玻璃瓶內，在暗處保存。
組織解離液
（1）取硝酸10ml，加入100ml水中，混勻。 （2） 取鉻酸10g，加水100ml使溶解。用時將二液等量混合，即得。
品紅甘油膠
取動物膠1g，加水6ml，浸泡至溶化，再加甘油7ml，加熱並輕輕攪拌至完全混勻，用紗布濾於培養皿內，加鹼性品紅溶液(鹼性品紅0.1g，加無水乙醇600ml及樟油80ml，溶解)適量，混勻，凝固後即得。
α－萘酚試液
取15％的α－萘酚乙醇溶液10.5ml,緩緩加硫酸6.5ml，混勻後再加乙醇40.5ml及水4ml，混勻，即得。
銅氨試液
取碳酸銅0.5g，加水適量，置乳體中研磨，再加濃氨溶液10ml使溶解，即得。
硝酸汞試液
取汞4.5g ，加發煙硝酸3ml，俟作用完畢，加等量水稀釋，即得。
本液應置棕色玻璃塞瓶內，在暗處保存。
氯化鋅碘試液
取碘化鉀8g，加水8.5ml使溶解,再加無水氯化鋅2.5g使溶解，加碘適量至飽和，即得。
本液應置棕色玻璃塞瓶內保存。"
（見附錄ⅩⅤ Ｂ）。
釕紅試液
取10％醋酸鈉溶液1～2ml，加釕紅適量使呈酒紅色，即得。
本液應臨用新制。
間苯三酚試液
取間苯三酚1g，加90％乙醇100ml使溶解，濾過，即得。
本液應置棕色玻璃瓶內，在暗處保存。
組織解離液
（1）取硝酸10ml，加入100ml水中，混勻。 （2） 取鉻酸10g，加水100ml使溶解。用時將二液等量混合，即得。
品紅甘油膠
取動物膠1g，加水6ml，浸泡至溶化，再加甘油7ml，加熱並輕輕攪拌至完全混勻，用紗布濾於培養皿內，加鹼性品紅溶液(鹼性品紅0.1g，加無水乙醇600ml及樟油80ml，溶解)適量，混勻，凝固後即得。
α－萘酚試液
取15％的α－萘酚乙醇溶液10.5ml,緩緩加硫酸6.5ml，混勻後再加乙醇40.5ml及水4ml，混勻，即得。
銅氨試液
取碳酸銅0.5g，加水適量，置乳體中研磨，再加濃氨溶液10ml使溶解，即得。
硝酸汞試液
取汞4.5g ，加發煙硝酸3ml，俟作用完畢，加等量水稀釋，即得。
本液應置棕色玻璃塞瓶內，在暗處保存。
氯化鋅碘試液
取碘化鉀8g，加水8.5ml使溶解,再加無水氯化鋅2.5g使溶解，加碘適量至飽和，即得。
本液應置棕色玻璃塞瓶內保存。"
