根據典型病史, 受累骨骼肌極易疲勞, 經休息和服用抗膽鹼酯酶藥物後有所好轉可予診斷。 不典型者可作進一步診斷性試驗。
1.疲勞試驗 受累肌肉重複收縮後出現無力。 如令患者眼球上視, 觀察眼瞼無力而下垂時為陽性。
2.藥物試驗
新斯的明試驗:肌內注射0.5~1mg, 30分鐘後症狀好轉為陽性。
依酚氯銨試驗:靜脈注射2mg, 觀察20秒, 如無反應則用30秒緩慢加給8mg, 1分鐘內症狀好轉者為陽性。
3. 重複電刺激單纖維肌電圖 低頻和高頻刺激尺神經或面神經, 如出現動作電位遞減10%以上為陽性。 陽性率約70%。