1、雞胚接種
將可疑的病損材料接種於已孵育7天的雞胚絨毛尿囊膜內， 經一段時間培養後取材置玻片上， 在空氣中乾燥後染色鏡檢， 尋找有無本菌。 但本法易被污染， 操作也煩瑣。
2、組織病理
用HE染色可見損害中心部表皮缺失， 潰瘍活動邊緣表皮為假性上皮瘤樣增生， 真皮內可見組織細胞、單核細胞、漿細胞及少數淋巴細胞。 用姬姆薩染色， 可在腫大的組織細胞內見到多囊分隔空間， 其中有1～20個Donovan小體。
3、組織壓印片檢查
鏡檢可在大單核細胞的胞漿中找到成簇的藍色的“別針”樣菌。
4、病損組織液的塗片檢查
從病損處刮取組織液作塗片， 如病損為腫塊， 應從腫塊邊緣刮取， 如病損發展成為潰瘍， 應先清洗潰瘍表面， 然後刮取組織液作塗片。 常用瑞特或姬姆薩染色， 也可作革蘭氏染色。 在革蘭氏染色中， 本菌為革蘭氏染色陰性的球桿菌， 大小為1.5 μm×0.7μm。
有時可見菌體外包有莢膜， 酷似“別針”。 在瑞特染色中， 菌體呈藍色， 莢膜呈紅色。 有時在大單核細胞內可發現有莢膜的菌體， 呈圓形或卵圓形， 直徑為1～2μm， 稱為Donovan小體。
