四杯定位細菌培養法是男性下尿路感染定位檢測的金標準， 對細菌前列腺炎的診斷有著獨特的意義， 然而其在臨床實踐應用中並非總是那麼清楚和完善。
有學者認為在測試結果模糊時可反復進行前列腺按摩液的評估予以彌補。 也有學者提出若前列腺按摩液或按摩後尿液中分離出非致病的凝固酶陰性的葡萄球菌， 而前列腺液鏡檢中白細胞又不增高時則可以置之不管。
此外， 還有學者認為在上尿路感染， 膀胱尿液中存在有細菌時， 為了避免感染的尿液污染尿道與前列腺分泌液，
一些學者認為前列腺按摩後， 約有0.1ml前列腺液滯留於尿道， 而5~10ml的按摩後尿液有可能將其稀釋50~100倍， 因而影響按摩後尿液的細菌計數， 如果沒有前列腺按摩液培養陽性菌種的佐證往往導致判斷上的困難， 因為按摩後尿液或前列腺按摩液的細菌計數較之膀胱初始尿至少要大於其10倍， 最好是大於其100倍， 才無可爭辯地確立細菌性前列腺炎的診斷。
也有人並不接受上述觀點， 認為若膀胱初始尿及中段尿標本中每毫升細菌數不足3000， 而前列腺按摩液或按摩後尿液中卻大於每毫升5000， 則高度提示細菌性前列腺炎的可能，
