胸部X線檢查:左至右分流量大的病例, 胸部X線檢查顯示心臟擴大, 尤以右心房、右心室增大最為明顯。 肺動脈總幹明顯突出, 兩側肺門區血管增大, 搏動增強, 在透視下有時可見到肺門舞蹈, 肺野血管紋理增粗。 主動脈弓影縮小。 慢性充血性心力衰竭病人, 由於極度擴大的肺部小血管壓迫氣管, 可能顯示間質性肺水腫、肺實變或肺不張等X線徵象。
心電圖檢查:典型的病例常顯示右心室肥大, 不完全性或完全性右束支傳導阻滯。 心電軸右偏。 P波增高或增大, P-R間期延長。 額面心向量圖QRS環呈順時針方向運行。
超聲心動圖檢查:超聲心動圖檢查顯示右心室內徑增大, 左室面心室間隔肌部在收縮期與左室後壁呈同向的向前運動, 與正常者相反, 稱為室間隔矛盾運動。 雙維超聲心動圖檢查可直接顯示房間隔缺損的部位和大小。
心導管檢查:右心導管檢查是診斷心房間隔缺損的可靠方法。 右心房、右心室和肺動脈的血液氧含量高於腔靜脈的平均血液氧含量達1.9容積%以上, 說明心房水準有左至右血液分流。 此外, 心導管進入右心房後可能通過房間隔缺損進入左心房, 從心導管在缺損區的上下活動幅度,
心血管造影檢查:心導管進入左心房後注射造影劑作電視攝片檢查,
近年來, 超聲心動圖的研究與應用進展迅速, 已可對第2孔型心房間隔缺損作出明確診斷, 因此典型的不伴有併發症的兒童及青少年病例已不需常規進行右心導管檢查、心血管造影和指示劑稀釋曲線測定等有創傷性的檢查。