丙肝的實驗室診斷

RIA或者ELISA

即：放射免疫診斷（RIA）或酶聯免疫試驗（ELISA）檢測血清中抗HCV

丙肝病毒模式圖1989年， Kuo等建立了抗-C-100放射免疫試驗方法（RIA）， 隨後 Ortho公司又研製成功酶聯免疫試驗方法（ELISA）檢測抗-C-100。 這兩種方法均用重組酵母表達的病毒抗原（C-100-3， 為NS4編碼的蛋白， 含363個氨基酸）， 經純化後包被微量塑膠板孔， 然後加被檢血清， 該病毒抗原即與被檢血清中抗-C-100結合， 最後加同位素或酶標記的鼠抗人lgG單克隆抗體， 加底物顯色判斷結果。 用上述酶聯免疫試驗法（ELISA）檢測抗-C-100有如下缺點： 1. 抗-C-100出現較晚， 約半數輸血後丙型肝炎病人于輸血後4～6個月抗-C-100首次陽轉，

因此， 不宜作為急性丙型肝炎的常規實驗室診斷; 2.抗-C-100不是中和抗體， 也不是lgM抗體， 而是lgG 抗體; 3.本法不夠靈敏， 少數丙型肝炎病人檢測不到抗-C-100; 4.有非特異性， 一些自家免疫性慢性肝病患者可出現假陽性， 因此， 抗HCV陽性需作重組免疫印跡試驗（Recombinant Immune Blot Assay， RIBA， 或稱 Western Blot）證實。 由於HCV核心抗體出現較早， 因此， 最近美國第二代酶聯免疫試驗法（ELISA）檢測抗HCV。 該試劑盒採用HCVC區編碼蛋白C-22-3和非結構區NS3編碼蛋白C-33-3和C-100-3包被載體。 用本法檢測抗HCV， 其檢出率可提高25～30%， 且檢出抗HDV的時間也可提早16～42天。

HDV cDNA/聚合酶鏈反應

（HCV cDNA/Polymerase Chain Reaction， RTPCR）測定肝和血清中HCV RNA。 本法是將HDV RNA逆轉錄為HCV DNA， 選用高度保守的5′非編碼區引物擴增放大後作電泳觀察結果。 本法較靈敏。 由於肝和血清中HCV RNA出現較抗-HCV為早， 一些HCV感染者抗HCV尚未陽轉時，

其肝和血清中已可測到HDV RNA。 HCV RNA陽性， 說明病毒在體內複製;HCV RNA陰轉， 說明病毒被清除。 因此， RT-PCR可作為丙型肝炎的早期診斷和獻血員篩查的出現指標， 也可作為丙型肝炎預後的一個指標。