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愛滋病檢測方法及優缺點

愛滋病毒檢測方法有很多種, 搜集的檢測方法介紹如下:

一、HIV病毒分離

常用方法:用活細胞、組織、胚胎或動物分離病毒。

細胞培養分離病毒主要過程:細胞培養, 病毒分離和病毒鑒定。

基本原理:病毒在活的敏感細胞、組織、胚胎或動物體內複製繁殖。

意義:從病變部位(活檢組織、腦脊液、皰疹液、體腔積液)或血液中分離到病毒的診斷意義很大。 從糞便中分離到病毒(如巨細胞病毒, 腸道病毒等)的意義應結合其它病毒學檢查結果(如抗病毒抗體等)來判定。

HIV病毒分離檢測方法評價:優點:是診斷病毒性疾病的金標準,

特異性強, 能發現新病毒, 反應傳染性, 可在試驗動物中驗證。

缺點:耗時長, 一般只能做回顧性診斷, 成本和技術要求高, 敏戌性不高, 有些病毒無法或極難培養, 不同的病毒需要不同的分離方法。

發展方向:短時細胞培養加免疫螢光或免疫酶染色法快速檢測病毒抗原。

二、電子顯微鏡直接檢查HIV病毒

常用方法:普通電子顯微鏡檢查, 免疫電子顯微鏡檢查。

基本原理:標本經負染處理後, 根據病毒顆粒的形態作出判斷。

意義:能根據病毒顆粒的形態診斷, 如輪狀病毒、腺病毒、甲型肝炎病毒、星狀病毒等。

電子顯微鏡直接檢測技術的評價:優點:可直接檢測標本;能發現新病毒;能直觀地顯示組織或細胞內的病毒。 可用於檢測極難分離的病毒。

缺點:機器價格昂貴, 技術要求高, 不太適用於常規病毒學診斷試驗或大量標本的檢測;病毒量較大時才易得到陽性結果, 應用範圍有限, 且不能鑒別病毒的血清型。

三、檢測HIV病毒的抗原成分

常用方法:對組織或細胞內的病毒成分可用免疫螢光染色、免疫酶染色等;對細胞外的或可溶性的病毒成分可用方法有:凝集試驗、酶聯免疫吸附試驗(ELISA)、放射免疫、免疫滲濾層析試驗(膠體金)等。

基本原理:抗病毒抗體致敏的血球或吸附抗病毒抗體的載體顆粒與病毒結合; 病毒抗原和抗體在凝膠中相遇形成沉澱線; 標記的抗病毒抗體與相應的病毒抗原結合或反應, 通過某種指示系統顯示病毒抗原的存在。

意義:對大多數病毒而言, 病毒抗原陽性一般可作為診斷急性病毒感染的依據。 但對有些病毒(如巨細胞病毒, 受滋病毒, 乙肝病毒), 病毒抗原陽性常不能說明宿主的感染狀態, 如急性、慢性或攜帶狀態。 該方法能用於早期快速診斷病毒感染, 特別適用於臨床。

四、病毒血清學(HIV抗體檢測)

常用方法:中和試驗、補體結合試驗、血凝抑制試驗、免疫螢光、免疫酶染色、ELISA、化學發光、時間分辨免疫螢光、螢光偏振、膠體金。

基本原理:抗原和抗體特異性地結合或反應, 通過某種指示系統顯示病毒抗體的存在。

意義:恢復期血清中抗病毒抗體滴度≥4倍升高有診斷意義; 血清抗病毒IgM抗體陽性可作為診斷該病毒近期感染的依據。

HIV抗體檢測化學發光法評價:優點:正常用免疫學方法中最敏感,

判斷結果較客觀, 可自動化, 一次可檢測大量標本。 缺點:多為進口產品, 試劑和儀器較貴。

HIV抗體檢測ELISA法評價:

優點:可用機器判讀結果, 便於自動化和一次性檢測大量標本, 檢測病毒抗體的敏感性比免疫螢光法或免疫酶法高。

缺點:檢測抗原時, 與免疫螢光法相比, 敏感性較低, 一般只能檢測可溶性病毒抗原。

發展方向:重組抗原, 捕獲法。

IV抗體檢測免疫螢光或免疫酶染色法評價:

優點:能檢測細胞內的抗原, 需要相對較少的細胞, 固定後的標本可存放相當長的時間, 能顯示病毒抗原的組織學和細胞學分佈特點。 免疫酶染色法不需要螢光顯微鏡。 工作人員需有豐富的經驗, 試驗結果可能受主觀因素的影響。

免疫酶染色有可能受內源性酶的影響出現假陽性。 間接法的敏感性比直接法的敏感性高, 但特異性稍低。

五、HIV RNA基因診斷(檢測病毒遺傳物質, 如PCR)

常用方法:PCR、模式或巢式PCR、逆轉錄PCR

基本原理:在體外條件下(至少1對DNA引物, dNTP, 緩衝液)DNA聚合酶催化合成與範本DNA互補的新鏈。

意義:病毒核酸陽性一般可作為診斷病毒感染的依據, 但對有些病毒(如巨細胞病毒, 愛滋病毒, 乙肝病毒), 不能說明宿主感染狀態, 如急性、慢性或攜帶。 由於PCR的敏感性非高常, 實驗條件要求嚴格, 根據PCR試驗結果有時尚不能確定病毒或現疾病的關係, 該技術在檢測不同標本, 診斷不同病毒性疾病中的意義有待進一步評價。

HIV RNA基因PCR檢測評價:優點:敏感、特異, 是目前使用的病毒學診斷技術中最敏感的技術方法; 一次可檢測 較大量標本;能檢測出與宿主細胞基因組整合的病毒核酸序列;可用於檢測目前不能或不易分離的病毒。

缺點:對診斷未知病毒的感染無能為力,被檢測的病毒核酸序列必須已經清楚;需要較多儀器設備,試驗成本較高;有試驗污染的可能性。

發展方向:雜交PCR,定量PCR

愛滋病毒常用檢測方法有很多種,每個醫院和疾控不會完全採用,而是提供幾種愛滋病檢查方法。一般用於愛滋病初篩檢測都是用HIV抗體檢測方法,目前普遍採用的是酶聯免疫法ELISA,化學發光法和膠體金快速法(愛滋病檢測試紙),隨著生活節奏加快,目前愛滋病檢測發展方向也越來越快速了,愛滋病檢測試紙(膠體金)這種高科技新型的檢測方法,得到了廣泛應用,還被用於個人家庭自測,只需要十五分鐘,準確率卻高達99.7%以上,相當於疾控中心專業水準。

是目前使用的病毒學診斷技術中最敏感的技術方法; 一次可檢測 較大量標本;能檢測出與宿主細胞基因組整合的病毒核酸序列;可用於檢測目前不能或不易分離的病毒。

缺點:對診斷未知病毒的感染無能為力,被檢測的病毒核酸序列必須已經清楚;需要較多儀器設備,試驗成本較高;有試驗污染的可能性。

發展方向:雜交PCR,定量PCR

愛滋病毒常用檢測方法有很多種,每個醫院和疾控不會完全採用,而是提供幾種愛滋病檢查方法。一般用於愛滋病初篩檢測都是用HIV抗體檢測方法,目前普遍採用的是酶聯免疫法ELISA,化學發光法和膠體金快速法(愛滋病檢測試紙),隨著生活節奏加快,目前愛滋病檢測發展方向也越來越快速了,愛滋病檢測試紙(膠體金)這種高科技新型的檢測方法,得到了廣泛應用,還被用於個人家庭自測,只需要十五分鐘,準確率卻高達99.7%以上,相當於疾控中心專業水準。

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