心電圖檢查:視室間隔缺損口徑的大小和病期的早晚而異。 小口徑的缺損心電圖可正常。 較大的缺損, 初期階段示左心室高血壓、左心室肥大;隨著肺血管阻力增加和肺動脈壓力升高, 逐步出現左、右心室合併肥大;最終主要是右心室肥大, 並可出現不全性束支傳導阻滯和心肌勞損等表現。
超聲心動圖檢查:可發現室間隔缺損處回聲中斷和心室、心房和肺動脈主幹擴大情況。 高位較大缺損合併主動脈瓣關閉不全者, 可見舒張期瓣膜脫垂情況。 彩色多普勒檢查可見經缺損處血液分流情況和併發主動脈瓣脫垂者舒張期血液倒流情況。
胸部X線檢查:小口徑缺損、左向右分流量較少者, 常無明顯的心、肺和大血管影像改變, 或僅示肺動脈段較飽滿或肺血管紋理增粗。 口徑較大的缺損, 當肺血管阻力增加不著, 呈大量左至右分流者, 則示左心室和右心室擴大, 如左心室特別擴大, 提示可能為巨大高位缺損合併主動脈瓣關閉不全;肺動脈段膨隆, 肺門和肺內血管影增粗, 主動脈影相對較小。
右心導管檢查:測定和對比右側心腔的血氧含量, 如右心室較右心房高出1.0%容積, 說明心室水準有左至右分流;分流量較少的小口徑缺損, 或缺損口徑雖不算小, 但已有明顯的肺動脈高壓致使左向右分流量減少者, 右室/右房血氧差常不足1.0容積%, 疑有此種情況時, 應加作吸氫試驗, 對比觀察右側心腔各處氫離子曲線出現的時間, 如右室較右房明顯超前出現, 說明心室水準有左至右分流;嚴重肺動脈高壓、心室水準呈雙向或反向分流者,
心血管造影:逆行性插管至主動脈根部, 加壓注入造影劑,